实验目的
实验原理
实验内容及步骤

基因工程是现代生物技术的核心课程,具有内容多、理论性强、概念抽象、技术性强等特点。而基因工程实验是一门理论与技术并进的新兴学科,较之传统的实验教学方式,创新性虚拟仿真实验教学更有利于提升学生的综合能力

南京林业大学《基因工程》教学大纲中本课程的目的任务为:

(1) 对整个基因工程的研究概况、理论础、技术原理、实验设计和应用前景等方面有所了解与掌握;

(2) 解基因工程的重要进展和发展趋势。

基因工程内容由两部分组成:上游为表达载体构建,包括:目的基因的克隆、载体的

构建与连接、转化、阳性克隆的筛选等;下游为基因表达,即将含有目的基因的表达载

体转入受体,如细菌、真菌、动物、植物等,使之表达,是受体材料具备新的遗传特性,

从而定向改造生物。

Bt 基因目前广泛应用于植物抗虫基因工程。本实验通过基因工程核心技术——DNA

重组技术,构建受伤口诱导 PPR1 启动子驱动的 Bt 基因植物表达载体,然后通过根癌农

杆菌介导,采用叶盘法将 Bt 基因转入木本植物模式物种-杨树。

通过本实验,(1)能比较深刻地理解DNA重组技术的原理,掌握DNA重组技术的方法和原理;

(2)对根癌农杆菌介导的遗传转化Ti质粒和双元载体结构和原理有一定的了解;比较深刻地理解根癌农杆菌介导植物遗传转化的机制原理;

(3)掌握木本植物常用的遗传转化方法——叶盘法基本流程和实验操作技术;

以上内容涵盖了基因工程核心内容,涉及了基因工程研究中的基本理论、研究方法、技术原理,符合《基因工程》教学大纲的要求在有限的课时内让学生理解和运用已学

知识进行实验,全面提升学生的理论知识与实验技巧,培养综合素质。

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